2023 Автор: Stephanie Arnold | [email protected]. Последно модифициран: 2023-05-20 19:52
Повечето изолати на S. aureus са податливи на ванкомицин. Концентрацията на ванкомицин, необходима за инхибиране на тези щамове (наречена минимална инхибиторна концентрация или MIC), обикновено е между 0, 5 и 2 микрограма / mL (µg / mL). За разлика от това, изолатите на S. aureus, за които MIC на ванкомицин са 4-8 µg / mL, са класифицирани като междинно съединение на ванкомицин, а изолатите, за които MIC на ванкомицин са ≥16 µg / mL, са класифицирани като резистентни на ванкомицин. Преработените определения за класифициране на изолатите на S. aureus се основават на критериите за интерпретация, публикувани през януари 2006 г. от Института по клинични и лабораторни стандарти (CLSI, по-рано NCCLS) *.
CLSI изброява само критерии за интерпретация на чувствителната дифузна дифузия (в мм) за ванкомицин и Staphylococcus spp. Не е имало достатъчен брой нечувствителни изолати за разработване на устойчиви и междинни точки на прекъсване. Организмите, за които диаметрите на зоната на ванкомицин са> = 15 mm, се считат за чувствителни, въпреки че няколко проучвания показват, че тази точка на прекъсване е ненадеждна за откриване на щамове VISA.
* Институт за клинични и лабораторни стандарти / NCCLS. Стандарти за ефективност за тестване на чувствителност към антимикробни средства. Шестнадесета информационна добавка. M100-S16. Уейн, PA: CLSI, 2006.
Какво представлява институтът за клинични и лабораторни стандарти (CLSI, по-рано NCCLS)?
CLSI е глобална, интердисциплинарна, нестопанска организация, разработваща стандарти и образователна организация, която насърчава разработването и използването на доброволни стандарти и насоки за консенсус в здравната общност. Отидете на: CLSI външна икона.
Какво е гликопептид-междинно съединение. aureus (GISA)?
Терминът гликопептид се отнася до група антимикробни средства, която включва ванкомицин и тейкопланин. Тъй като първите два изолата на VISA в Съединените щати също бяха устойчиви на теикопланин, терминът гликопептид-междинен S. aureus (GISA) беше използван за обозначаване на този по-широк профил на устойчивост. Докато GISA може да бъде по-специфичен термин за щамове, междинни както за ванкомицин, така и за тейкопланин, не всички щамове на VISA са междинни за тейкопланин; следователно VISA е по-точен и широко използван термин.
Защо са важни изолатите VISA и VRSA?
Ванкомицинът продължава да бъде важен антимикробен агент за лечение на инфекции, причинени от щамове S. aureus, които са устойчиви на оксацилин (MRSA) и други антимикробни средства. Намалената чувствителност на щамовете VISA и VRSA към ванкомицин оставя клиницистите със сравнително малко терапевтични възможности за лечение на тези инфекции.
Могат ли рутинните тестове за чувствителност да открият VISA и VRSA?
Не всички методи за изпитване на чувствителност откриват изолатите на VISA и VRSA. Три от шест потвърдени VRSA изолати не бяха надеждно открити от автоматизирани системи за тестване в неотдавнашен доклад. Впоследствие някои производители са оптимизирали своите системи за откриване на VRSA, така че лабораториите трябва да проверят с производителите, за да установят дали системата им има FRA клирънс за откриване на VRSA. VRSA се откриват чрез еталонно микроразреждане на бульон, разреждане на агар, Etest®, MicroScan® за една нощ и Synergies plus ™; BD Phoenix ™ система, система Vitek2 ™, дискова дифузия и плоча с агар на ванкомицин [агар на мозъчната сърцевина (BHI), съдържащ 6 µg / ml ванкомицин].
Изолатите на VISA не се откриват чрез дифузия на диска. Методите, които обикновено откриват VISA, са неавтоматизирани MIC методи, включително микроразреждане на референтен бульон, разреждане на агар и Etest®, използвайки стандарт 0.5 McFarland за приготвяне на инокулум. Автоматизирани методи и ванакомицинови екрани с агар плочи обикновено откриват VISA, за който микрокомите на ванкомицин са 8 µg / ml, но са необходими допълнителни проучвания, за да се определи нивото на чувствителност на тези методи за S. aureus, за който микрокомите на ванкомицина са 4 µg / ml.
Лабораториите, които използват автоматизирани методи, които не са валидирани за откриване на VRSA, трябва също така да включват анкарна плоча с анкамицинов екран за подобрено откриване на VRSA. Ако е възможно, лабораториите трябва да включват екранната табела с ванкомицин агар за тестване на всички S. aureus. Алтернативно, скринингът може да бъде ограничен до MRSA изолати, тъй като почти всички VISA и всички VRSA, докладвани към днешна дата (т.е. април 2006 г.) също са MRSA. Лабораториите, които използват дифузия на диска за определяне на чувствителността към ванкомицин, трябва да обмислят добавяне на втори метод за откриване на VISA. Екранната плака с ванкомицин е полезна за откриване на VISA (MIC = 8 µg / ml). Надеждното откриване на VISA (MIC = 4 µg / ml) може да изисква неавтоматизиран MIC метод.
Информацията за методите за тестване на чувствителност и техните ограничения трябва да бъде предоставена на клиницистите, може да се поиска допълнително изследване, когато се подозира намалена чувствителност към ванкомицин.
Какво представлява екранният тест на ванкомицин агар?
Екранният тест на ванкомицин агар използва комерсиално подготвени агарови плочи за скрининг на чисти култури от бактерии за ванкомицин. Тези плочи съдържат BHI агар и 6 ug / ml ванкомицин. 10 ц1 инокулум от 0, 5 McFarland суспензия трябва да бъде забелязан върху агара с помощта на микропипета (крайна концентрация = 106 CFU / ml). Алтернативно, тампон може да се потопи в суспензията на McFarland, експресираната излишна течност и да се използва за инокулиране на екрана на плочата с ванкомицинов агар. За контрол на качеството лабораториите трябва да използват Entercococcus faecalis ATCC 29212 като чувствителен контрол и E. faecalis ATCC 51299 като устойчив контрол. На табелка могат да бъдат тествани до осем изолати; контрол на качеството трябва да се извършва всеки ден на тестване. Растежът на повече от една колония се счита за положителен резултат. Всички стафилококи, които растат на тези плаки, трябва да бъдат проверени за чистота и оригиналните клинични изолати трябва да бъдат тествани с помощта на изчистен от FDA MIC метод за потвърждение. Плочките, приготвени вътрешно, използвайки различни партиди носители, се изпълняват непоследователно и са по-ниски от тези, получени в търговската мрежа (CDC непубликувани данни). Производителността на готовите търговски плочи варира в зависимост от индивидуалния производител.
Изискват ли се някакви модификации на рутинната дискова дифузия и MIC методите при тестване на ванкомицин и стафилококи?
Тестването трябва да включва следните препоръки на CLSI:
- Инокулум: Използвайте директна суспензия за колонии
- Инкубация: 35 ° C, околен въздух, за цели 24 часа.
- Крайна точка: Проучете внимателно дали няма индикации за растеж
Съгласно най-новите стандарти на CLSI (по-рано NCCLS) ванкомицин-междинен или-устойчив резултат за стафилококи изолат трябва да бъде проверен чрез повторение на валидиран MIC метод и идентификация на организма.
Какви специални стъпки трябва да се предприемат, когато S. aureus се подозира, че е VISA или VRSA?
Моля, вижте алгоритъма за тестване на VISA / VRSA, който представя стратегия за откриване и потвърждаване на VISA и VRSA, използвайки подходящи методи за тестване.
Трябва ли повторното тестване да включва някакви специфични антимикробни средства, които може да не са включени в рутинния панел?
Да. Следните допълнителни антимикробни средства трябва да бъдат тествани срещу изолати на VISA и VRSA: Клиндамицин, даптомицин, линезолид, хинупристин / далфопристин, рифампин и триметоприм-сулфаметоксазол. Лабораториите на Отдела за повишаване на качеството на здравеопазването на центровете за контрол и превенция на заболяванията (CDC) ще извършат тестове за тези допълнителни антимикробни средства. Важно е да изпратите вероятни изолати от VISA и VRSA до CDC възможно най-бързо, дори ако лабораторията има възможност да тества вътрешни агенти; за улесняване на потвърждаването на организма и засилване на усилията за контрол на инфекцията. Изолатите трябва да бъдат изпращани до CDC чрез вашия местен или държавен здравен отдел. CDC може да бъде уведомен за предполагаемата VISA / VRSA, като изпрати имейл до Посетете Надзор за възникваща антимикробна резистентност, свързана със здравеопазването (SEARCH) за повече информация.
Как местните клинични лаборатории трябва да спасяват предполагаемите изолати на VISA или VRSA?
Най-добре е изолатите да се замразяват при -60 ° C или по-ниско в стандартна хранителна среда, например бульон, съдържащ 15% глицерол, или в дефибринирана овча кръв. Ако обаче лаборатория не може да направи това, изолатът трябва да бъде субкултивиран до неселективен агарен наклон (напр. Триптиказен соев агар) и инкубиран за една нощ при 35 ° С. На следващия ден капачките трябва да се затегнат и наклоните да се съхраняват при 2-8 ° C. Повторните субкултури трябва да бъдат сведени до минимум преди съхранение.
Изолатни ли са VISA и VRSA изолатите на оксацилин?
Досега всички изолати на VRSA са устойчиви на оксацилин (т.е. MRSA) и съдържат резистентния ген mecA. Повечето изолати на VISA също са устойчиви на оксацилин. Въпреки това, два изолата на VISA стават чувствителни към оксацилин при многократно изолиране от пациента и един е чувствителен към оксацилин, но съдържа мека.
Какви са механизмите на съпротива за VRSA и VISA?
Досега всички изолати на VRSA съдържат ген за резистентност на vanA vancomycin. VanA генът обикновено се намира в ентерококи и обикновено придава на тези организми резистентност към високо ниво на ванкомицин (MICs = 512-1024 µg / ml). Повечето VRSA-позитивни пациенти са имали анамнеза, причинена от ензимококи, резистентни на ванкомицин (VRE), съдържащи vanA и MRSA. Вероятно е определянето на vanA чрез плазмиди или транспозони от VRE към щама на MRSA, което води до VRSA.
Механизмът на намалена чувствителност към ванкомицин при щамове VISA не е напълно изяснен. Клетките VISA имат по-дебели клетъчни стени, които съдържат много субединици на клетъчната стена, способни да свързват ванкомицин извънклетъчно и да променят няколко метаболитни пътя. Ванкомицинът трябва да достигне клетъчната мембрана и да се свърже с растящия комплекс на клетъчната стена, за да инхибира растежа на клетките.
Трябва ли VISA и VRSA да бъдат докладвани на екипа за контрол на инфекцията?
Да. Съществува значителна загриженост относно разпространението на VISA и VRSA сред пациентите поради ограничените възможности за лечение. Ако се подозира наличието на VISA или VRSA, трябва да се предприемат специфични предпазни мерки за контрол на инфекцията, за да се намали рискът от предаване на VISA / VRSA на други пациенти. Изключително важно е лабораторните работници да се свържат незабавно с екипа за контрол на инфекцията при съмнение за VISA или VRSA. Освен това, лабораториите трябва да уведомяват местния и / или държавния здравен отдел и отдела за повишаване на качеството на здравеопазването, Координационния център по инфекциозни заболявания, CDC, като изпращат имейл до Изолатът трябва да бъде запазен и изпратен до здравния отдел и CDC за потвърдително тестване.
Къде мога да науча повече за тестването за антимикробна чувствителност?
CDC разработи инструмент за обучение за лаборатори, за да подобри тяхното разбиране и да повиши умението си в извършването на тестове за чувствителност към антимикробни средства (MASTER).
Как да докладвам VISA или VRSA на CDC?
